올리고뉴클레오타이드 기반 치료제는 현대 의학에서 가장 유망한 약물 계열 중 하나로 자리 잡았습니다. 유전자 수준에서 질병을 표적으로 삼는 능력은 타의 추종을 불허하지만,
이러한 요구에 부응하기 위해 Kymos Italy는 올리고뉴클레오티드 기반 치료제의 CMC 특성화를 위한 포괄적인 분석 플랫폼을 구축하도록 설계된 연구 개발 프로젝트인 OligoXplorer를 개발했습니다 .
이 프로젝트는 카메리노 대학교(UNICAM) 생명과학 및 수의학과와 협력 하여 수행되었으며 Regione Marche의 혁신 프로그램(PR Marche FESR 2021/2027)에 따라 공동 자금 지원을 받았습니다 .
OligoXplorer는 과학적 범위를 넘어 Kymos Group에 중요한 이정표를 세웠습니다. TIDES 분야에서의 경험을 통합하고 올리고뉴클레오티드에 대한 CMC 테스트로 포트폴리오를 확장했기 때문입니다 .
분석 과제 이해
올리고뉴클레오타이드는 소분자와 생물학적 제제 사이에 위치하며 , 전통적인 화학적 방법에는 너무 크고 대부분의 생물 검정에는 너무 작습니다. 큰 크기, 높은 극성, 그리고 이차 구조를 형성하는 경향 때문에 분리, 정량 및 시퀀싱이 어렵습니다 . 앞서 언급했듯이, 서열 길이나 화학적 성질의 미세한 변화도 효능, 특이성 및 안정성에 영향을 미칠 수 있습니다 .
이러한 이유로 규제 기관은 서열 동일성을 확인하고, 함량을 정량화하고, 불순물을 특성화하는 직교 분석 방법을 중심으로 구축된 포괄적인 CMC 패키지를 기대합니다 . 이 모든 것이 검증되고 재현 가능한 조건에서 이루어집니다.
OligoXplorer는 바로 이러한 과제를 해결하기 위해 고안되었습니다. 즉, 초기 개발부터 GMP 릴리스 테스트까지 올리고뉴클레오티드 특성화의 모든 단계를 지원할 수 있는 방법을 탐색, 개발 및 검증하는 것입니다 .
3가지 주요 분석 영역
이 프로젝트는 시퀀싱, 분석, 그리고 관련 물질의 세 가지 주요 분석 영역에 초점을 맞추었습니다. 각 영역은 올리고뉴클레오타이드 제어의 핵심 품질 속성(CQA)을 다룹니다.
시퀀싱: 분자 동일성 확인
올리고뉴클레오티드가 올바른 서열을 가지고 있는지 확인하는 것은 안전성과 효능을 보장하기 위한 첫 번째 단계입니다 .
이탈리아에 있는 저희 팀은 시퀀스 동일성을 확인하고 짧은 변이체, 긴 변이체 또는 화학적 변형과 같은 미묘한 변이체를 밝혀낼 수 있는 LC-MS 및 HR-MS 워크플로를 구축하고 개선했습니다.
크로마토그래피 분획법은 MS 분석 전에 이러한 변이체를 분리하여 분해능과 신뢰도를 향상시키는 데 도움이 되었습니다. 그 결과 , 일상적인 CMC 검사에 적합한 명확하고 고품질의 식별 데이터를 제공하는 방법론 세트가 개발 되었습니다.
검정: 함량 및 강도 측정
올리고뉴클레오타이드를 정량하는 것 역시 어려운 일이며, 이를 정확하게 수행하는 것은 효능과 용량 재현성을 위해 필수적 입니다. 올리고뉴클레오타이드의 물리화학적 특성은 특히 일상적인 검사에서 회복과 반응에 영향을 미칠 수 있습니다.
이를 극복하기 위해 Kymos Italy는 정밀한 정량화를 위한 LC-UV 및 LC-MS 방법을 개발하고 검증했습니다 .
분석법 검증은 선형성, 정밀도, 그리고 견고성을 평가하는 과정이며, 크로마토그래피 최적화는 주요 피크를 분해 또는 불순물 신호로부터 분리하는 데 도움을 줍니다. 그 결과 , GMP 환경의 배치 출하 및 안정성 프로그램에 사용할 수 있는 검증되고 목적에 적합한 분석법이 제공 됩니다.
관련 물질: 순도 및 제품 무결성 보장
아주 작은 불순물이라도 치료 효과에 영향을 미칠 수 있습니다 . 합성 과정에서 올리고뉴클레오타이드는 다양한 절단되거나 길어진 종(n-1, n+1)을 생성하거나, 산화 또는 탈퓨린화를 통해 화학적 불순물을 생성할 수 있습니다. 이러한 불순물을 식별하고 정량화하는 것은 제품 안전 및 규정 준수에 필수적입니다 .
저희 이탈리아 팀은 OligoXplorer를 통해 이러한 종을 높은 감도로 검출하고 정량화하는 LC-UV 및 LC-MS 불순물 프로파일링 워크플로를 구축했습니다. 배치별 비교 연구를 통해 공정 제어 및 안정성 평가에 대한 적합성을 확인했습니다.
이러한 발전을 통해 제품의 순도와 무결성에 대한 완벽한 그림을 얻을 수 있습니다.
보완적 분석 역량
OligoXplorer를 통해 개발된 핵심 분석 영역 외에도, Kymos Group은 올리고뉴클레오타이드 물질 및 제형에 필요한 다른 테스트도 수행할 수 있습니다 . 일부는 자체적으로 직접 수행되며, 다른 일부는 해당 분야에서 입증된 경험을 가진 신뢰할 수 있는 파트너를 통해 수행됩니다.
저희 팀은 HPLC-CAD를 통해 LNP 제형의 지질 함량을 측정 할 수 있습니다. 이는 캡슐화 효율과 제형 일관성을 평가하는 핵심 지표입니다. 또한 잔류 용매, 아세트산나트륨 함량, 원소 불순물에 대한 검사를 제공하여 현행 ICH 및 EMA 품질 기준을 완벽하게 준수합니다.
물리적 특성 분석 또한 중요합니다. 동적 광산란(DLS)을 사용하여 입자 크기 분포, 응집 상태, 다분산도를 측정하여 제품의 안정성과 균질성을 평가할 수 있습니다.
Kymos Group은 이러한 보완적 연구를 CMC 분석과 결합하여 올리고뉴클레오티드 품질에 대한 완벽한 그림을 제공합니다 .
연구에서 구현까지
OligoXplorer에서 개발된 방법들은 단순한 프로토타입이 아닙니다. 이미 이탈리아 Kymos에서 구현되어 있으며, 올리고뉴클레오티드 개발자들을 위한 검증된 분석 서비스로서 올리고뉴클레오티드 CMC를 위한 일관된 분석 플랫폼으로 활용되고 있습니다 . 각 방법은 대표적인 합성 올리고를 사용하여 개발, 최적화 및 검증되었으며, 이제 특정 고객 프로젝트에 맞게 조정할 수 있습니다.
여기에는 신원 확인, 분석 정량화, 불순물 프로파일링이 포함되며, 모두 GMP를 준수하는 조건에서 수행되고 당사의 숙련된 분석 팀의 지원을 받습니다 .
이를 통해 Kymos Group은 이탈리아와 독일에 있는 회사의 강점을 결합하여 올리고뉴클레오티드 치료제에 대한 통합 CMC 및 생물분석 지원을 제공하는 소수의 유럽 CRO 중 하나가 되었습니다.
앞으로의 전망
OligoXplorer를 통해 Kymos Italy는 이제 그룹 내 올리고뉴클레오티드 CMC 분석 분야의 우수 센터로 자리매김했습니다 . 이 프로젝트를 통해 얻은 경험을 바탕으로 저희 팀은 질량 분석, 크로마토그래피 분석법 개발, 그리고 올리고뉴클레오티드에 적용되는 불순물 프로파일링 분야의 전문 지식을 통합할 수 있었으며, 이러한 역량은 이제 고객 프로젝트 지원에 완벽하게 활용되고 있습니다.
올리고뉴클레오티드 기반 약물을 개발하는 파트너에게 이러한 역량은 초기 방법 개발부터 규제 제출까지 더 빠르고 안정적인 CMC 지원을 의미합니다.
궁극적으로 이 이니셔티브는 과학적 우수성, 규정 준수, 분석 테스트 혁신을 결합하여 파트너가 환자에게 더 안전하고 효과적인 올리고뉴클레오티드 기반 의약품을 제공하도록 돕는 Kymos Group의 사명을 강화합니다.
