L’eparina è un glicosaminoglicano solforato, presente come una miscela di molecole eterogenee di peso molecolare variabile, utilizzato in medicina come anticoagulante. È presente nei tessuti dei mammiferi e viene solitamente ricavato dalla mucosa intestinale o da altri tessuti di mammiferi domestici adatti all’alimentazione umana. Viene purificato per mantenere una combinazione di attività contro diverse frazioni della sequenza coagulativa del sangue. È composto da polimeri di derivati alternati della D-glucosamina (N-solfatata, O-solfatata o N-acetilata) e dell’acido uronico (acido L-iduronico o acido D-glucuronico) uniti da legami glicosidici. Il frazionamento delle eparine produce le eparine a basso peso molecolare (LMWH) che presentano alcuni vantaggi rispetto alle eparine non frazionate.
Storia recente
In risposta alla crisi di adulterazione dell’eparina del 2007/2008, che ha causato almeno 81 decessi negli Stati Uniti a causa di un’adulterazione con condroitin solfato sovrasolfatato (OSCS) della materia prima prodotta in Cina, le farmacopee statunitensi ed europee hanno rivisto le loro monografie sull’eparina . USP32-NF27 e Ph Eur. Ed.
Basi scientifiche del test
Il fattore Xa e il fattore IIa, o trombina, sono proteine idrolitiche o peptidasi che svolgono un ruolo nella via finale comune della cascata della coagulazione. Il fattore Xa media la trasformazione della protrombina in fattore II. Il fattore II, a sua volta, media la conversione del fibrinogeno solubile in fibrina, che è insolubile e costituisce la membrana plasmatica.
Protrombina + Fattore Xa → Fattore IIa
Fibrinogeno + Fattore IIa → Fibrina (Tessuto)
L’attività dei fattori IIa e Xa è inibita dall’antitrombina (AT), modulando la cascata della coagulazione: un aumento dell’attività dell’AT produrrà una diminuzione della coagulazione e viceversa. L’eparina si lega all’AT producendo un cambiamento conformazionale che aumenta il suo effetto inibitorio sui fattori IIa e Xa. Questo potenziamento dell’effetto inibitorio su queste peptidasi determina l’effetto anticoagulante delle eparine nell’uso farmacologico. Le eparine a basso peso molecolare catalizzano la reazione tra fattore IIa e antitrombina meno facilmente rispetto alla reazione che coinvolge il fattore Xa . Al contrario, l’eparina non frazionata catalizza entrambe le reazioni in egual misura.
Contributo di Kymos
I kit disponibili in commercio non sono sempre una buona soluzione e potrebbero richiedere miglioramenti a seconda dell’origine dell’eparina, della concentrazione, dei contaminanti e di altri fattori. Anche l’implementazione del test compendiale della Farmacopea è complessa, anche nei laboratori con esperienza in questo tipo di test, ed è raccomandata una validazione del metodo. Kymos ha sviluppato e validato i metodi della Farmacopea Europea e della Farmacopea Americana (USP) e fornisce servizi di testing in conformità alle GMP. Scopri di più sui nostri servizi GMP per farmaci biologici e biosimilari .
