Test delle endotossine: un approccio completo presso Kymos Group

Presso Kymos Group, ampliamo costantemente le nostre capacità analitiche per supportare e soddisfare le esigenze dell’industria farmaceutica e biotecnologica con soluzioni di controllo qualità all’avanguardia. I test sulle endotossine sono fondamentali per la sicurezza di farmaci iniettabili, biologici e dispositivi medici, e abbiamo aggiornato il nostro catalogo di servizi per offrire l’intera gamma di metodi compendiali per il rilevamento delle endotossine, come descritto nelle Farmacopee europea e statunitense.

Per offrire ai nostri clienti la massima flessibilità, abbiamo recentemente aggiunto i metodi turbidimetrico cinetico e rCR (Recombinant Cascade Reagent), rendendo il nostro portfolio ora completamente completo . Queste aggiunte ci consentono di personalizzare l’approccio migliore per ogni progetto specifico e di adattarci ai requisiti normativi e dei clienti.

Cosa sono le endotossine e perché sono un problema?

Le endotossine sono lipopolisaccaridi (LPS) presenti nella membrana esterna dei batteri Gram-negativi . La presenza di queste sostanze nei prodotti farmaceutici rappresenta un rischio importante perché possono scatenare gravi risposte immunitarie nell’uomo . Queste risposte possono manifestarsi con febbre e infiammazione, o evolvere in condizioni gravi e potenzialmente letali come lo shock settico.

Le endotossine sono inoltre termostabili e resistenti a molti processi di sterilizzazione convenzionali e, per questo motivo, le agenzie di regolamentazione di tutto il mondo impongono limiti rigorosi per le endotossine su iniettabili, biologici e dispositivi medici.

Tutti questi fattori sono la ragione per cui metodi di test solidi e sensibili sono essenziali per prevenire la contaminazione e garantire la sicurezza dei pazienti.

Quali sono i metodi per il test delle endotossine?

I metodi impiegati per i test delle endotossine si basano principalmente sui test delle endotossine batteriche (BET), come descritto in farmacopee quali la Farmacopea degli Stati Uniti (USP) e la Farmacopea europea (Ph. Eur.) :

• Metodo Gel-Clot – Il test tradizionale e più semplice del lisato di amebociti di Limulus (LAL). Si tratta di un test qualitativo o semiquantitativo basato sull’attivazione di un enzima coagulante nel reagente LAL da parte delle endotossine e fornisce un risultato positivo in caso di formazione visibile di un coagulo di gel. Viene normalmente utilizzato per screening iniziali o per il rilascio di lotti di routine, poiché i suoi risultati sono solo stime qualitative o approssimative della concentrazione.
  
• LAL cromogenico cinetico: un metodo quantitativo che misura il colore prodotto dalla reazione tra LAL ed endotossine, consentendo di determinarne la concentrazione con elevata sensibilità e accuratezza. Questi saggi sono ampiamente utilizzati per determinare il rispetto di specifici limiti di rilevamento delle endotossine.
• LAL cinetico turbidimetrico: un metodo quantitativo che, invece di misurare il colore, misura l’aumento di torbidità con il progredire della reazione LAL. Questo test fornisce un metodo rapido e ad alta produttività per quantificare con precisione le endotossine , rendendolo il candidato ideale per test su larga scala.
• Reagente a cascata ricombinante (rCR): un metodo quantitativo alternativo ai tradizionali test LAL che si basa sul reagente LAL, derivato dal sangue di limuli. Questo test, che non prevede l’uso di animali, include le tre proteine ricombinanti (Fattore C ricombinante, Fattore B ricombinante ed enzima procoagulante ricombinante), i tre componenti della cascata enzimatica LAL che forniscono un’alternativa più sostenibile, mantenendo al contempo accuratezza e conformità.

Grazie alla recente aggiunta dei metodi cinetico turbidimetrico e rCR, ora possiamo eseguire tutte e quattro le metodologie di test delle endotossine, garantendo flessibilità ai nostri clienti e soddisfacendo al contempo i requisiti e gli standard normativi.

Scelta del metodo corretto per il test delle endotossine

Ogni metodo di analisi delle endotossine ha i suoi vantaggi e la scelta migliore dipende da diversi fattori. Grazie alla nostra esperienza e al nostro team specializzato, guidiamo i nostri clienti nella scelta del metodo più adatto alle loro esigenze , bilanciando conformità normativa, efficienza e rigore scientifico.

I fattori su cui basiamo le nostre decisioni sono:

• Requisiti normativi : le farmacopee come USP e Ph. Eur. riconoscono tutti e quattro i metodi, ma normative specifiche possono favorirne uno rispetto all’altro per determinate applicazioni.
• Requisiti di sensibilità e accuratezza : quando si decide il metodo da utilizzare, si tiene sempre conto del livello richiesto di accuratezza di rilevamento e quantificazione.
• Caratteristiche del prodotto: la natura del prodotto testato (la sua composizione, viscosità, colore, ecc.) può influenzare l’idoneità di un metodo particolare rispetto a un altro.
• Tempistiche del progetto: per progetti con tempistiche stringenti, i metodi ad alta produttività, come il LAL cinetico turbidimetrico o il cromogenico cinetico, offrono vantaggi grazie ai rapidi tempi di risposta.
• Considerazioni etiche : il metodo del fattore C ricombinante è un’alternativa che non prevede l’impiego di animali, il che favorisce pratiche sostenibili ed etiche nel settore.

La nostra esperienza con i test delle endotossine

Nell’ambito del nostro impegno continuo per la crescita e l’ampliamento del nostro portafoglio di servizi, abbiamo recentemente implementato il metodo cinetico turbidimetrico LAL e il metodo del reagente a cascata ricombinante (rCR) , che ci consentono di offrire tutti i metodi di analisi delle endotossine raccomandati dalla farmacopea.

Per il test LAL cinetico turbidimetrico, utilizziamo una tecnologia di seconda generazione che fornisce risultati quantitativi rapidi e accurati, adattandosi ai tempi di risposta dei nostri clienti, mentre per il metodo rCR, impieghiamo i più recenti progressi nelle tecnologie ricombinanti che ci consentono di garantire accuratezza, robustezza e comparabilità superiori , offrendo al contempo ai nostri clienti un’alternativa senza animali ai tradizionali test compendiali sulle endotossine batteriche per coloro che aderiscono al principio 3R nei test sugli animali.

In Kymos Group, ci impegniamo a fornire soluzioni complete e flessibili per i test delle endotossine, che soddisfino i più elevati standard di qualità e conformità normativa. La nostra vasta esperienza e la recente aggiunta di metodi di test avanzati ci consentono di personalizzare il nostro approccio in base alle esigenze specifiche di ogni progetto . Scegliendo Kymos Group, collaborerete con un team dedicato a garantire la sicurezza e l’efficacia dei prodotti farmaceutici e biotecnologici attraverso test delle endotossine affidabili e sensibili.

Per maggiori informazioni su questi metodi o per assistenza con i vostri progetti di test sulle endotossine, contattate commercial@kymos.com. Saremo lieti di fornirvi consulenza e supporto dettagliati.