Nel giugno 2024, la FDA ha pubblicato la versione definitiva delle linee guida intitolate ” Considerazioni di farmacologia clinica per lo sviluppo di terapie oligonucleotidiche – Guida per l’industria”. Questo documento sostituisce la bozza del 2022 e fornisce raccomandazioni per assistere l’industria nello sviluppo di terapie oligonucleotidiche, ma pone anche nuove sfide per sviluppatori e produttori.
In precedenza, Maria Fauth, responsabile del reparto acidi nucleici di Kymos , aveva condiviso la sua esperienza nell’implementazione della bozza delle linee guida nel 2022 ; ora il nostro team ha rivisto questa versione finale e preparato un riepilogo degli aspetti più critici e della nostra esperienza in merito.
Terapie oligonucleotidiche e nuove linee guida
Le terapie oligonucleotidiche modulano l’espressione genica per trattare una specifica condizione o patologia mediante degradazione mirata al clivaggio mediata dall’RNasi H, modulazione dello splicing, inibizione dell’RNA non codificante, attivazione genica e editing genetico programmato (1). Lo sviluppo di terapie oligonucleotidiche è cresciuto negli ultimi anni e queste terapie e nuovi farmaci includono oligonucleotidi antisenso (ASO), siRNA, anti-miR o antagomir (oligonucleotidi anti-miRNA), aptameri, ripetizioni palindromiche clusterizzate regolarmente interspaziate (CRISPR) e oligonucleotidi chimicamente modificati (1,2)
Dall’inizio del 2020, diverse terapie oligonucleotidiche sono state approvate dalla FDA. Tuttavia, l’ampio utilizzo di queste terapie ha incontrato alcune sfide, tra cui le più significative: il raggiungimento di un rilascio efficiente nei tessuti bersaglio oltre al fegato e la presenza di alcune interazioni e tossicità (1,3).
Fortunatamente la FDA ha recentemente pubblicato la versione definitiva delle linee guida per le terapie oligonucleotidiche, evidenziando le seguenti considerazioni nello sviluppo di queste nuove terapie:
- Caratterizzazione del prolungamento dell’intervallo QTc e del potenziale proaritmico (valutato dal centro clinico)
- Esecuzione di valutazioni del rischio di immunogenicità
- Caratterizzazione dell’impatto della compromissione epatica e renale sulla farmacocinetica, farmacodinamica e sicurezza.
- Considerazioni sulla valutazione delle interazioni farmacologiche.
Esperienza del gruppo Kymos con gli acidi nucleici
Il Dipartimento di Acidi Nucleici di Kymos vanta una vasta esperienza nella bioanalisi di diversi acidi nucleici e terapie oligonucleotidiche, ed è stato pioniere nella quantificazione della bioanalisi dei miRNA dal 2016. Il nostro dipartimento, guidato da Maria Fauth, vanta competenze nello sviluppo di metodi da zero e, soprattutto, ha implementato le linee guida FDA nella convalida conforme alle GLP dei nostri metodi analitici sin dalla loro bozza pubblicata nel 2022, tenendo sempre traccia di tutti gli ultimi aggiornamenti della FDA.
Sulla base di queste attuali linee guida e utilizzando tecnologie all’avanguardia, Kymos è in grado di fornire competenze in:
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Valutazione dell’immunogenicità:
Come menzionato nelle linee guida, una risposta immunitaria indesiderata può essere generata da Oligonucleotide Therapeutics per diverse ragioni, che devono essere prese in considerazione durante il processo di produzione e testate seguendo un approccio basato sul rischio e incluse in una valutazione del rischio di immunogenicità specifica del prodotto, come descritto nelle linee guida della FDA Immunogenicity Assessment for Therapeutic Protein Products (agosto 2014).
La valutazione clinica dell’immunogenicità per le terapie oligonucleotidiche solitamente include l’approccio multilivello della FDA che Kymos ha seguito nel corso degli anni, come affermato nelle linee guida della FDA “Immunogenicity Testing of Therapeutic Protein Products – Developing and Validating Assays for Anti-Drug Antibody Detection” (febbraio 2019). Kymos è in grado di determinare gli ADA leganti e neutralizzanti, utilizzando l’elettrochemiluminescenza ( ECLA-MSD® ) e i saggi cellulari .
Inoltre, le nuove linee guida della FDA indicano che, quando appropriato, anche l’attivazione immunitaria innata indesiderata dovrebbe essere misurata, ad esempio includendo il rilascio di citochine indotto da oligonucleotidi terapeutici. Utilizzando la tecnologia Multiplex MSD® e Luminex® , Kymos è in grado di rilevare contemporaneamente diverse citochine e biomarcatori nello stesso campione , riducendo tempi, costi e quantità di campione.
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Biodistribuzione e farmacocinetica:
Come accennato in precedenza, il rilascio di oligonucleotidi nel tessuto bersaglio e l’accumulo epatico rappresentano una sfida importante. Kymos può fornire risultati conformi alle GLP sulla distribuzione e la farmacocinetica dei farmaci. Il nostro reparto di Acidi Nucleici ha eseguito diverse determinazioni di biodistribuzione, diffusione ed espressione genica mediante qPCR e RT-qPCR. Siamo esperti nello sviluppo di metodi in matrici diverse e complesse. Forniamo calcoli farmacocinetici e statistiche utilizzando il software Phoenix WinNonlin® 8.2 gold standard.
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Valutazione delle interazioni farmacologiche:
I farmaci oligonucleotidici sono metabolizzati principalmente dalle nucleasi e non dipendono dagli enzimi del citocromo P450 (CYP). Pertanto, la loro farmacocinetica non è significativamente influenzata dagli induttori o inibitori degli enzimi CYP. Le potenziali interazioni farmacologiche dei farmaci oligonucleotidici che inducono o inibiscono gli enzimi o i trasportatori CYP vengono valutate nelle prime fasi dello sviluppo del farmaco in vitro. I farmaci oligonucleotidici mostrano generalmente un impatto minimo sugli enzimi CYP. Tuttavia, potrebbero essere necessarie valutazioni specifiche in base alle modifiche chimiche e alle modalità di somministrazione. In questa fase, Kymos può supportare la valutazione dell’induzione e dell’inibizione del CYP mediante saggi di attività enzimatica e sul livello di espressione dell’mRNA.
Conclusioni
Il campo delle terapie oligonucleotidiche è cresciuto negli ultimi anni, diventando rapidamente un trattamento promettente per diverse patologie complesse. Questi trattamenti avanzati vengono oggi costantemente sviluppati e prodotti e pertanto le agenzie regolatorie stanno fornendo linee guida per garantirne l’efficacia e la sicurezza per il pubblico.
Kymos sarà lieta di affiancarvi e assistervi lungo tutto il processo di sviluppo del trattamento oligonucleotidico. Siamo orgogliosi di essere aggiornati sull’implementazione delle ultime linee guida fornite dalla FDA relative alle terapie oligonucleotidiche e di poter mettere a vostra disposizione la nostra competenza nelle determinazioni necessarie.
Per maggiori informazioni su questi progressi o per assistenza con i vostri progetti sugli acidi nucleici, contattate commercial@kymos.com . Saremo lieti di fornirvi consulenza e supporto dettagliati.
Bibliografia
- Roberts, T; Langer, R e Wood, M. Progressi nella somministrazione di farmaci oligonucleotidici. (2020). Nature Reviews Drug Discovery volume 19 , pagine 673–694 ( https://www.nature.com/articles/s41573-020-0075-7 )
- Krützfeldt, J. et al. (2005) Silenziamento dei microRNA in vivo con antagomir . Nature 438 , 685–689.
- Gagliardi, M e Ashizawa, AT (2021). Le sfide e le strategie della somministrazione di farmaci tramite oligonucleotidi antisenso. Biomedicines 16;9(4):433. doi: 3390/biomedicines9040433 ( https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC8072990/ )
