Les thérapies à base d’oligonucléotides constituent l’une des classes de médicaments les plus prometteuses de la médecine moderne. Leur capacité à cibler les maladies au niveau génétique est inégalée, mais
Pour répondre à ce besoin, Kymos Italie a développé OligoXplorer , un projet de recherche et développement conçu pour créer une plateforme analytique complète pour la caractérisation CMC des produits thérapeutiques à base d’oligonucléotides .
Ce projet a été réalisé en collaboration avec l’Université de Camerino (UNICAM) – École des biosciences et de médecine vétérinaire et cofinancé par la Région des Marches dans le cadre de son programme d’innovation (PR Marche FESR 2021/2027).
Au-delà de sa portée scientifique, OligoXplorer marque une étape importante pour le groupe Kymos : il consolide notre expérience dans le domaine des TIDES et élargit notre portefeuille avec les tests CMC pour les oligonucléotides .
Comprendre le défi analytique
Les oligonucléotides se situent entre les petites molécules et les produits biologiques : trop grands pour les méthodes chimiques classiques, trop petits pour la plupart des bioessais. Leur taille importante, leur forte polarité et leur tendance à former des structures secondaires rendent leur
C’est pourquoi les organismes de réglementation exigent des dossiers CMC complets, construits autour de méthodes analytiques orthogonales qui confirment l’identité de la séquence, quantifient le contenu et caractérisent les impuretés ; le tout dans des conditions validées et reproductibles.
OligoXplorer a été conçu précisément pour répondre à ces défis : explorer, développer et valider des méthodes capables de prendre en charge chaque étape de la caractérisation des oligonucléotides , du développement précoce aux tests de libération GMP.
Trois principaux domaines d’analyse
Le projet s’est concentré sur trois principaux domaines analytiques : le séquençage, le dosage et les substances apparentées . Chacun couvre un attribut de qualité critique (AQC) dans le contrôle des oligonucléotides.
Séquençage : Confirmation de l’identité moléculaire
Déterminer qu’un oligonucléotide porte la séquence correcte est la première étape pour garantir la sécurité et l’efficacité .
Notre équipe en Italie a mis en place et perfectionné des flux de travail LC-MS et HR-MS capables de confirmer l’identité de la séquence et de révéler des variantes subtiles telles que des séquences plus courtes, plus longues ou des modifications chimiques.
Le fractionnement chromatographique a permis d’isoler ces variants avant l’analyse par spectrométrie de masse, améliorant ainsi la résolution et la fiabilité. Il en résulte un ensemble de méthodes fournissant des données d’identification claires et de haute qualité, adaptées aux tests CMC de routine .
Analyse : Mesure de la teneur et de la force
La quantification des oligonucléotides présente également des difficultés, et sa précision est essentielle pour garantir la puissance et la reproductibilité des doses . Leurs propriétés physico-chimiques peuvent influencer la récupération et la réponse, notamment lors des tests de routine.
Pour surmonter cette difficulté, Kymos Italy a développé et validé des méthodes LC-UV et LC-MS pour une quantification précise.
La validation de la méthode porte sur la linéarité, la précision et la robustesse, tandis que l’optimisation chromatographique permet de séparer le pic principal des signaux de dégradation ou d’impuretés. Il en résulte une méthode d’analyse validée et adaptée à l’usage prévu, prête à être utilisée dans les programmes de libération de lots et de stabilité en environnement BPF .
Substances apparentées : Garantir la pureté et l’intégrité du produit
Même de faibles impuretés peuvent affecter l’efficacité thérapeutique . Lors de la synthèse, les oligonucléotides peuvent produire diverses espèces tronquées ou allongées (n–1, n+1), ou générer des impuretés chimiques par oxydation ou dépurination. Leur identification et leur quantification sont essentielles pour la sécurité du produit et la conformité réglementaire .
Grâce à OligoXplorer , notre équipe italienne a mis au point des protocoles de profilage des impuretés par LC-UV et LC-MS permettant de détecter et de quantifier ces espèces avec une grande sensibilité. Des études comparatives entre lots ont confirmé leur pertinence pour le contrôle des procédés et l’évaluation de la stabilité.
Ensemble, ces développements offrent une image complète de la pureté et de l’intégrité du produit.
Capacités analytiques complémentaires
En plus des principaux domaines d’analyse développés grâce à OligoXplorer , Kymos Group propose d’autres tests souvent requis pour les matériaux et formulations d’oligonucléotides . Certains sont réalisés en interne, tandis que d’autres sont effectués par des partenaires de confiance possédant une expérience reconnue dans le domaine.
Nos équipes peuvent déterminer la teneur en lipides des formulations de LNP par HPLC-CAD , un paramètre clé pour évaluer l’efficacité d’encapsulation et la constance de la formulation. Nous proposons également des analyses de solvants résiduels, de teneur en acétate de sodium et d’impuretés élémentaires , garantissant ainsi la pleine conformité aux normes de qualité ICH et EMA en vigueur.
La caractérisation physique est tout aussi importante. Grâce à la diffusion dynamique de la lumière (DLS), nous pouvons mesurer la distribution granulométrique, l’état d’agrégation et la polydispersité , ce qui contribue à évaluer la stabilité et l’homogénéité du produit.
En combinant ces études complémentaires avec nos analyses CMC, le groupe Kymos offre une image complète de la qualité des oligonucléotides .
De la recherche à la mise en œuvre
Les méthodes développées dans le cadre d’OligoXplorer ne sont pas de simples prototypes ; elles sont déjà mises en œuvre chez Kymos Italie et proposées comme services analytiques validés aux développeurs d’oligonucléotides, constituant ainsi une plateforme analytique cohérente pour la CMC des oligonucléotides. Chaque méthode a été développée, optimisée et validée à l’aide d’oligonucléotides synthétiques représentatifs et peut désormais être adaptée aux projets spécifiques des clients.
Cela comprend la confirmation d’identité, la quantification des dosages et le profilage des impuretés, le tout réalisé dans des conditions conformes aux BPF et soutenu par nos équipes analytiques expérimentées .
Avec cela, Kymos Group devient l’une des rares CRO européennes à proposer un soutien intégré en matière de CMC et de bioanalyse pour les thérapies oligonucléotidiques , combinant les atouts de nos sites en Italie et en Allemagne.
Perspectives d’avenir
Avec OligoXplorer, Kymos Italie opère désormais comme un centre d’excellence pour l’analyse CMC des oligonucléotides au sein du Groupe . L’expérience acquise grâce à ce projet a permis à nos équipes de consolider leur expertise en spectrométrie de masse, en développement de méthodes chromatographiques et en profilage des impuretés appliqués aux oligonucléotides, des compétences désormais pleinement disponibles pour accompagner les projets de nos clients.
Pour les partenaires développant des médicaments à base d’oligonucléotides, ces capacités se traduisent par un soutien CMC plus rapide et plus fiable, depuis le développement précoce des méthodes jusqu’à la soumission réglementaire.
En définitive, cette initiative renforce la mission du groupe Kymos : allier excellence scientifique, conformité réglementaire et innovation dans les tests analytiques , afin d’aider nos partenaires à proposer aux patients des médicaments à base d’oligonucléotides plus sûrs et plus efficaces.
