Heparin ist ein sulfatiertes Glykosaminoglykan, das als Gemisch heterogener Moleküle mit unterschiedlichen Molekulargewichten vorliegt und in der Medizin als Antikoagulans eingesetzt wird. Es kommt in Säugetiergeweben vor und wird üblicherweise aus der Darmschleimhaut oder anderen für die menschliche Ernährung geeigneten Geweben von Nutztieren gewonnen. Es wird gereinigt, um eine Kombination von Aktivitäten gegen verschiedene Fraktionen der Blutgerinnungskaskade zu erhalten. Es besteht aus Polymeren alternierender Derivate von D-Glucosamin (N-sulfatiert, O-sulfatiert oder N-acetyliert) und Uronsäure (L-Iduronsäure oder D-Glucuronsäure), die über glykosidische Bindungen verknüpft sind. Durch Fraktionierung der Heparine werden niedermolekulare Heparine (NMH) gewonnen, die gegenüber nicht fraktionierten Heparinen einige Vorteile aufweisen.
Neuere Geschichte
Als Reaktion auf die Heparin-Verfälschungskrise von 2007/2008, die in den USA mindestens 81 Todesfälle durch die Verfälschung des in China hergestellten Rohmaterials mit übersulfatiertem Chondroitinsulfat (OSCS) verursachte, überarbeiteten die Arzneibücher der USA und der EU ihre Heparin-Monographien . USP32-NF27 und Ph. Eur. Ed. 7.
Wissenschaftliche Grundlage des Tests
Faktor Xa und Faktor IIa (Thrombin) sind hydrolytische Proteine bzw. Peptidasen, die im letzten gemeinsamen Schritt der Blutgerinnungskaskade eine Rolle spielen. Faktor Xa katalysiert die Umwandlung von Prothrombin in Faktor II. Faktor II wiederum katalysiert die Umwandlung von löslichem Fibrinogen in unlösliches Fibrin, das das Gewebe aufbaut.
Prothrombin + Faktor Xa → Faktor IIa
Fibrinogen + Faktor IIa → Fibrin (Gewebe)
Die Aktivität der Faktoren IIa und Xa wird durch Antithrombin (AT) gehemmt, wodurch die Gerinnungskaskade moduliert wird: Eine erhöhte AT-Aktivität führt zu einer verminderten Gerinnung und umgekehrt. Heparin bindet an AT und bewirkt eine Konformationsänderung, die die hemmende Wirkung auf die Faktoren IIa und Xa verstärkt. Diese Potenzierung der Hemmwirkung auf diese Peptidasen ist für die gerinnungshemmende Wirkung von Heparinen in der pharmakologischen Anwendung verantwortlich. Niedermolekulare Heparine katalysieren die Reaktion zwischen Faktor IIa und Antithrombin weniger stark als die Reaktion mit
Kymos Beitrag
Kommerziell erhältliche Kits sind nicht immer optimal und müssen je nach Heparinherkunft, -konzentration, Verunreinigungen und anderen Faktoren gegebenenfalls angepasst werden. Auch die Durchführung der Arzneibuchprüfung ist komplex, selbst in Laboren mit Erfahrung in diesem Bereich. Daher wird eine Methodenvalidierung empfohlen. Kymos hat die Methoden des Europäischen Arzneibuchs (Eur. Ph.) und des USP entwickelt und validiert und bietet Prüfdienstleistungen gemäß GMP-Richtlinien an. Erfahren Sie mehr über unsere GMP-Dienstleistungen für Biologika und Biosimilars .
